第三部分 脊椎动物适用和禁用的麻醉及安乐死方法

一、前言

动物安乐死的目的是以人道的方式使动物死亡，它以最低程度的疼痛、最短的时间使动物失去知觉和痛觉。在2000 Report of the AVMA (American Veterinary Medical Association) Panel on Euthanasia 中详细介绍了动物安乐死的各种方法和优缺点，本文仅对脊椎动物在科研、教学及检测应用范围内提供建议方法。

（一）以安乐死作为解除疼痛的选择

如无法以其他方式解除动物的疼痛(pain)或紧迫(distress)时，建议施予安乐死。在科学研究或教学中，如动物的死亡是可预期或必然的结果，则操作者应依据病理、生理或行为面详加判断动物实验或操作的终点(end points)，除非安乐死确实影响结果，否则应在动物呈现垂死、死后组织自体溶解、或死后被笼内其他同类相食前以人道的方式解决。安乐死不但可以解决动物遭受严重疼痛，并可透过完整的尸体解剖更近一步了解动物的状态，有助于实验或教学的进行。

（二）执行安乐死的时机

一般而言选择安乐死的考虑因素有：动物体重下降、消瘦、成长期动物未增重、无法有效控制的疼痛、过度的肿瘤增长或腹水产生、持续性的自残行为、疾病造成的全身性脱毛、因实验因素无法治疗的长期下痢、严重呼吸道感染、持续性的倦怠伴随粗糙的皮毛、拱背、腹围扩大、四肢无法行走、严重贫血、黄疸、异常的中枢神经反应(抽蓄、颤抖、瘫痪、歪头等)、无法控制的出血现象、排尿异常(无尿、多尿等)、影响进食饮水的病症、传染性疾病末期、严重低温、明显的功能损伤、动物遭受长期紧迫时的行为及生理现象等。

医院实验动物管理委员(IACUCs)、动物室负责人、兽医师应对实验动物的终点(end points)予以明确并制定相关政策、指南，研究人员、教师、教员应了解何时执行动物安乐死。

（三）安乐死：技术以及对执行者的冲击

由于动物失去知觉与死亡的时间点不尽相同，且有些如静脉注射或断头等方法需较高的技巧，难以由未接受训练的人员立刻操作、或者决定动物是否遭受疼痛或失去知觉。实验动物管理委员(IACUCs)与兽医师应建立操作人员训练计划，使操作人员学习正确的安乐死技术、了解动物安乐死的目的，并安排人员间的相互讨论，以舒解可能的心理紧迫。

（四）避免造成其他动物的恐惧感

紧迫的叫声、恐惧的行为、受惊吓动物的分泌物、信息素等，皆引起其他动物的焦虑和不安，这些因素会影响存活动物的身心平衡与福利，干扰实验或教学结果。因此，动物安乐死时，最好选择远离同种动物的非公开场所来执行。

（五）辅助执行安乐死

动物安乐死首要考虑为解除动物的疼痛与紧迫，因此面对神经质或难以驾御的动物，可先给予镇定剂或止痛剂等药物，以便降低动物的紧迫与恐惧。

（六）确认死亡

确认动物是否死亡是非常重要的事项。执行安乐死后人员需检查动物的心跳是否完全停止。停止呼吸不能作为判断死亡的依据，动物往往先停止呼吸，数分钟之后才停止心跳，尤其是使用二氧化碳进行安乐死时，需特别注意。

二、选择安乐死的药物与方法

动物安乐死的方法取决于动物品种，大小，温顺程度，兴奋度，对疼痛、紧迫、疾病的感受性，保定方法，操作是否需组织采样及其他因素。适当的物理性保定不仅可减低动物的恐惧、焦虑及疼痛，并可保障操作人员的安全。另外，人员的技术、动物的数量亦为安乐死程序是否顺利完成的重要因素。

选择安乐死药物与方法的准则：

l  使动物无疼痛、紧迫、焦虑、不安的失去知觉至死亡的能力

l  失去知觉至死亡花费的时间

l  可靠性

l  对操作人员的安全性

l  不可逆性

l  对操作和观察人员的情绪影响

l  对其后的评估、检验、组织应用的适合性

l  对品种、年龄、健康状况的适合性

l  价格与可利用性

l  效能与操作方便性

l  对环境的冲击

l  人员滥用药物的潜在性

安乐死的药物与方法有三类：吸入性药剂、非吸入性(化学性)药剂、物理性方法。安乐死时最好先抑制动物的中枢神经而使其失去知觉，解除疼痛感。因此，首选为使用过量的化学性麻醉药剂。动物一旦被施予深度麻醉，之后使用的安乐死方法选择性较多，也较人道。如因科学研究或教学所需无法使用麻醉剂，则使用物理性安乐死方法。

（一）吸入性药剂

常见药物如乙醚、halothane、methoxyflurane、isoflurane、enflurane、氮气、一氧化碳、二氧化碳等麻醉药剂。通常藉由麻醉机或可透视的密闭容器执行体重低于7公斤的小型哺乳动物与鸟类安乐死，由于仔兽对缺氧状态耐受性高，吸入药剂的时间需延长3-5倍，亦可配合其他方法共同进行。

大部分的吸入性药剂对人体有害，因此需在通风良好场所进行。乙醚具有易燃、易爆的性质，通常不建议使用。如因特殊需求而使用乙醚进行动物安乐死，则全程需在通风厨内操作，动物尸体需置于防爆冰柜内。氯仿对人具有肝毒性和致癌性，一氧化碳对人员有害，因此不建议使用。

二氧化碳是实验动物常用的吸入性安乐死药剂，吸入40％二氧化碳时很快达到麻醉效果，而长时间持续吸入时可导致动物死亡。它容易使用、价格便宜、无易燃易爆性、无异味，在通风良好的场所使用时较其他药剂更安全。利用罐装的二氧化碳，先放入动物，之后再缓慢持续加入二氧化碳，可减低动物死亡前的焦虑。动物停止呼吸后至少在箱内停留5-6分钟，检查动物确实死亡，之后再移除动物。每次操作时注意安乐死箱内勿过度拥挤，并且使用透视性佳的箱子，以便易于确认动物死亡。

（二）非吸入性药剂

多数为注射性药物，此类药剂有多种给予方法，但是静脉注射是最佳选择。如需给予心脏注射，需先学习相关技术，否则如因操作不当而使药物泄漏至胸腔或肺脏时，会导致动物痛苦、并延长死亡时间，因此只有在动物已呈现垂死、休克、或深度麻醉中才给予心脏注射。腹腔注射需使用较高剂量的药物，而且可能使动物死亡时间延长及死前挣扎。

巴比妥盐及其衍生物是动物安乐死的首选药物。它人道、安全、正确投药时效果迅速，静脉注射时可使动物安详的沉睡至死。巴比妥盐及其衍生物中sodium pentobarbital 的效果最佳，目前广泛使用于大部分动物的安乐死。使用此类药剂的缺点为必需每只动物个别保定后投予，且操作人员须具有动物静脉注射技术，由于可能造成人类滥用，此类药剂需按毒、麻药品的规定使用。对于难以驾御或过度神经质的动物，须先给予适当的镇定后注射。经药物镇定后的动物由于循环及心跳变慢，对于pentobarbital药物注射后的反应时间比直接给药来的慢，需特别注意。

深度麻醉中的动物可利用快速静脉注射KCl（2mmol/ kg）来完成安乐死，但未麻醉动物禁止直接注射KCl。

其他如KetamineHCl、xylazine、opiods等注射性药物，虽然高剂量注射时亦可使动物死亡，但由于死亡前动物常呈现疼痛及抽蓄现象，因此建议仅使用于动物的一般性保定、镇定、止痛及麻醉，勿做为动物安乐死用药剂。

（三）物理性方法

包括颈椎脱臼、断头、放血、枪击、电击等。物理性安乐死法在下列三种情形下经评估后使用：其解剖性状适合使用此法的小型脊椎动物；大型农场动物；其他安乐死方法会影响实验结果或教学效果时。有些人抗拒并排斥物理性方法，但是只要在良好的技巧与适当的工具配合下，它能迅速使动物解除疼痛并死亡。如未受过训练的人冒然实施物理性方法，不仅易造成人员受伤，更可能使动物未完全死亡而导致极大的痛苦。有些物理性方法，如电击等，则需配合使用第二种方法(如放血)或重复电击来完成安乐死。操作人员需接受完整的技术训练，并以尸体多次练习后才正式执行。

颈椎脱臼法常使用于体重低于200克的啮齿类动物、禽类、以及体重低于1公斤的仔兔。通过正确的训练技巧，人员可迅速将动物的颈椎与脊椎脱离，使动物死亡。除非有特殊实验需求，执行颈椎脱臼前动物应先给予镇定或吸入二氧化碳，以减低动物的窘迫。对于小型啮齿类动物，用拇指、食指压住头颈部，用另一只手抓住尾巴，迅速用力向后拉扯后驱，使颈椎脱离头颅；对于禽类，双手抓取脖子扭断；对于仔兔，一手抓头，另一手抓后肢，将身体迅速拉长，使颈椎脱离头颅。

因实验需求无法使用化学性药剂或二氧化碳实施安乐死时，可利用断头台（guillotine）砍断小型啮齿类动物或仔兔的头颈部。实施此法易造成人员的不适，亦较具危险性，因此需接受完整的技术训练。人员需温柔稳固的保定动物，快速地利用断头台将头颈连接处砍断。注意需随时保持断头台刀片的锐利度，并在每次使用后彻底清洗残留的血迹和气味。

如因实验所需采集动物的全身血液或放血，动物需先麻醉或失去知觉后执行。

三、适用的安乐死方法

（一）一般常用脊椎动物

说明：

1. ○：建议使用的方法； ×：不得使用的方法； △：一般情况不推荐使用，除非实验或教学需要（需说明于动物实验申请表，由IACUC审核通过后使用）。

2. Barbiturate 巴比妥盐类注射剂属管制药品，需事先申请审核可后使用。 Ketamine不得作为Barbiturate巴比妥盐的替代品注射于动物安乐死。

3. 出生仔鼠对二氧化碳（缺氧）耐受性高，建议安乐死方法为将仔鼠装入塑料袋，灌满二氧化碳，绑紧塑料袋，置入-15℃冰柜内。

（二）其他脊椎动物：

（三）巴比妥盐类(Barbiturate)的安乐死剂量(mg/kg):

注1：一般动物以麻醉剂量的3倍剂量为安乐死剂量

注2：数据取材自

（1）2000 Report of the AVMV Panel on Euthanasia。

（2）http://www.ahc.umn.edu。

（3）http://research.uiowa.edu/animal/?get=euthanasia

（4）乙醚易溶于血中,其引发之安乐死较为耗时。